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羊elisa试剂盒品牌

简要描述:

羊elisa试剂盒每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

  羊elisa试剂盒的保温:

  在建立ELISA方法作反应动力学研究时,ELISA检测试剂盒实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1~2小时,产物的天生可达顶峰。温育常采用的温度有43℃、37℃、室温顺4℃等。室温温育时要平置于操纵台上即可。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。保温的方式除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,ELISA检测试剂盒一般均采用水浴,可将ELISA试剂盒板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度迅速平衡。操纵时的室温应严格限制在划定的范围内,尺度室温温度是指20~25℃,但详细操纵时可根据仿单的要求控制温育。

  羊elisa试剂盒组织样本的处理:

  用预冷的PBS (0.01M,pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

  羊elisa试剂盒操作步骤说明:

  实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。

  1、加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。

  为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

  2、弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。

  3、温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

  4、每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。

  5、温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。

  6、依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

  7、依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

  8、用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。

  羊elisa试剂盒载体的外形主要有:

  1。微量滴定板、小珠和小试管。

  2.固相载体在ELISA测定过程中作为吸附剂和容器,不介入化学反应。

  3。板式及珠式ELISA的标本量一般为100-200ul,而小试管可根据需要加大反应体积,标本反应量的增加有助于试验敏感性的进步。ELISA试剂盒现在已有多种自动化仪器用于微量滴定板型的ELISA检测,包括加样、洗涤、保温、比色等步骤,对操纵的尺度化极为有利。

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