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猪elisa试剂盒在试验前后需要这样做
  • 发布日期:2019-07-09      浏览次数:26
    •    猪elisa试剂盒在试验前后需要这样做
        在这个特殊的季节中,我们应如何安全的保存猪elisa试剂盒,在此过程中需要我们注意哪些问题呢?
        1、样本的收集及血清分离中要留意尽量防止细菌污染,一则细菌的成长,其所排泄的一些酶或许会对抗原抗体等蛋白发生分化作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶自身会对用相应酶作符号的测定办法发生非特异性搅扰。
        2、要留意防止呈现严峻溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有相似过氧化物的活性,因而,在以HRP为符号酶的猪elisa试剂盒测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很简单在温育进程中吸附于固相,然后与后边参加的HRP底物反响显色。
        3、血清标本如是以无菌操作分离,则能够在2~8℃下保存一周,猪elisa试剂盒如为有菌操作,则主张冰冻保存。样本的长期保存,应在-70℃以下。
        4、冰冻保存的血清标本须留意防止因停电等形成的重复冻融。猪elisa试剂盒标本的重复冻融所发生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发生损坏作用,然后引起假阴性成果。此外,冻融标本的混匀亦应留意,不要进行剧烈振动,重复倒置混匀即可。
        5、标本在保存中如呈现细菌污染所造成的的混浊或絮状物时,应离心沉积后取上清检测。Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的试验确诊办法。因为其试剂安稳、易保存,操作简便,成果判断较客观等要素,已广泛应用在免疫学查验的各领域中。
        在进行猪elisa试剂盒实验时,各项条件的选择也是非常重要的:
        1、固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚苯乙烯、纤维素等。其形式可以是凹孔平板、珠粒等。目前常用的是四十孔的聚苯乙烯凹孔板。不论使用哪一种载体,在使用前进行筛选:在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应的均一性如何,以此来判断其吸附性能是否良好。
        2、包被抗体的选择:将抗体吸附在固相载体表面的时候,一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃ 18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度,进行包被后,当其它试验条件大致一样的情况下,观察阳性标本的OD值。选择蛋白量最少,OD值最大的浓度。
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